Qual è la differenza tra la gascromatografia e la cromatografia in fase liquida?

Differenze tra le metodologie

Le principali differenze tra la GC e la HPLC risiedono nella metodologia di ciascuna tecnica, ad esempio:

• Fase mobile utilizzata
  La principale differenza tra HPLC e GC è il tipo di fase mobile utilizzata, da cui la distinzione dei nomi. La HPLC utilizza un solvente per la fase mobile, puro o in miscela. La scelta dipende dalla polarità, dalla solubilità e dalla complessità del campione.
  Al contrario, la GC utilizza un gas inerte o non reattivo, noto anche come gas carrier. Il tipo di gas utilizzato dipende dal tipo di detector impiegato  per l’identificazione degli analiti.
• Tecniche di separazione
  La separazione dei composti in HPLC è determinata dall'interazione di ciascun composto del campione con la fase mobile e la fase stazionaria. Questa interazione è generalmente dovuta alla diversa polarità degli analiti nel campione rispetto alle fasi.
  I componenti più polari si sposteranno più rapidamente nella colonna poiché sono più attirati dalla fase mobile. I componenti meno polari si sposteranno più lentamente nella colonna poiché sono più attirati dalla fase stazionaria.
  Tuttavia, in GC, la separazione avviene in base alla rispettiva volatilità di ciascun composto del campione. Le molecole meno volatili si spostano più lentamente perché interagiscono di più con la fase stazionaria, mentre le molecole più volatili si spostano più rapidamente nella colonna con la fase mobile.
• Tipo di composto
  Il tipo di composto da analizzare determina anche il tipo di cromatografia da scegliere. La HPLC viene utilizzata per analizzare i composti non volatili e instabili ad elevate temperature. Si tratta di sostanze quali amminoacidi, farmaci e carboidrati.
  Al contrario, con la gascromatografia, la miscela di campioni deve essere volatile e termicamente stabile. Per questo motivo, la GC è generalmente utilizzata come tecnica di separazione per i campioni di aria ed emissioni.
• Temperatura
  In ragione della volatilità del campione, la GC deve essere eseguita a una temperatura molto più elevata rispetto alla HPLC. 
  La temperatura della colonna in gascromatografia è solitamente compresa tra 150 °C e 300 °C, mentre la cromatografia liquida opera a temperatura ambiente (circa 20 °C - 25 °C).
  Ciò può rendere il processo un po' più difficile per la gascromatografia poiché occorre prestare attenzione alla manipolazione della strumentazione, in particolare le colonne.
• Velocità di eluizione
  In ragione della volatilità del campione e dell'elevata temperatura della colonna, la GC è molto più rapida della HPLC.
  L'eluizione mediante GC può avvenire in pochi secondi o minuti. Infatti, la velocità di eluizione dipende dal campione analizzato e dalla portata del gas di trasporto (Elio, Azoto, Argon o Idrogeno).
• Risoluzione
  Dopo la separazione degli analiti e la risposta del rivelatore  si ottiene il cromatogramma, dal quale è possibile identificare i composti presenti nel campione. Tuttavia, può essere difficile distinguere i composti se hanno proprietà simili perché potrebbero avere tempi di ritenzione simili, segnali sovrapposti e quindi bassa risoluzione.
  Poiché la gascromatografia si basa sulla volatilità, un gascromatogramma può avere una bassa risoluzione per composti di peso molecolare simile. Analogamente, la polarità dei composti può causare una bassa risoluzione nei cromatogrammi della LC.

Metodo

Strumentazione

Applicazioni