Quali sono le diverse fasi di un’analisi  cromatografica?

Le tipologie di tecniche cromatografiche

Le tecniche cromatografiche generalmente sono suddivise in due classi principali, a seconda della fase mobile:

• Gascromatografia: la fase mobile è un gas come Elio, Idrogeno o Azoto.
• Cromatografia liquida: la fase mobile è un liquido come soluzioni di etanolo PBS, metanolo, ecc.

La proprietà principale dei gas carrier è l'insolubilità nei liquidi. La loro qualità (purezza e quantità di impurezze presenti) è fondamentale per evitare eventuali interferenze con la fase stazionaria (liquida o solida).
La corretta scelta dei gas evita l'interferenza del segnale e il rumore della linea di base nel cromatogramma.

La gamma Air Liquide Alphagaz^TM è stata progettata con gli obiettivi di assicurare qualità durante la produzione e controllo delle impurezze oltre che per soddisfare le esigenze della cromatografia.

Tipi di cromatografia e fasi

La tabella seguente presenta i tipi più comuni di cromatografia, oltre alle relative fasi e agli acronimi.

I gas nelle tecniche analitiche con fase liquida

La cromatografia in fase liquida abbinata a rivelatori di spettrometria di massa è una modalità o, più precisamente, una tecnica analitica molto accurata e precisa con un ampio campo di applicazione, il che la rende molto utilizzata nei centri e laboratori di ricerca.

Il rivelatore MS richiede un flusso di azoto per:

1. Eliminare in modo efficace il solvente dal campione prima di eseguire l’identificazione e quantificazione degli analiti presenti.
2. Nebulizzare il campione. 
3. Raccogliere e analizzare il campione ionizzato verso l'ingresso dello spettrometro di massa.

Soluzioni di approvvigionamento

Per i laboratori sono disponibili diverse soluzioni a seconda di quanti strumenti LC-MS sono in uso e della loro frequenza di utilizzo:

• Bombole o pacchi (a seconda del volume necessario) con una centrale a scambio automatico per passare dalla sorgente di bombole vuote a quella piena senza interrompere la fornitura di gas.
• Contenitore per liquidi con evaporatore.
• Generatore di azoto in loco. Quest’ultimo è possibile e consentito tenendo conto della qualità dell'azoto richiesta dal produttore dell'analizzatore (intorno a N30, ossia una purezza del 99,9%). L'utilizzo di un generatore di azoto è una scelta tradizionale e pratica. In ogni caso, questa strumentazione di natura meccanica ed elettrica necessita di manutenzione ed è vivamente consigliato prevedere una riserva di bombole e un sistema di rete di gas.

Cromatografia a fluido supercritico

La cromatografia liquida a fluido supercritico utilizza la CO₂ (qualità Alphagaz^TM SFC - composizione 99,998%) fornita in forma liquida in diversi formati:

• Bombole (50 litri di volume d'acqua) o pacchi con tubo pescante.
• Piccoli contenitori per liquidi.

I principali vantaggi della SFC rispetto alla cromatografia liquida (LC) sono una migliore efficacia delle separazioni di una miscela e una maggiore velocità di analisi.

La CO2 in fase supercritica (pressione e temperatura controllata) presenta notevoli vantaggi: 

• Facilmente disponibile 
• Economicamente vantaggiosa
• Non tossica 
• Non esplosiva 
• Non è un solvente organico 
• Inoltre consente di effettuare una lavorazione delicata del prodotto a condizioni di temperatura moderate (<100 °C) e una facile separazione del solvente e dell'estratto.